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    Millipore/MAB4072 | Anti-BrdU Antibody, clone 131-14871/MAB4072/100 µg
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    Millipore/MAB4072 | Anti-BrdU Antibody, clone 131-14871/MAB4072/100 µg

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    貨號: MAB4072
    品牌: Millipore
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      • Description
        CatalogueNumberMAB4072
        BrandFamilyChemicon®
        TradeName
        • Chemicon
        DescriptionAnti-BrdUAntibody,clone131-14871
        AlternateNames
        • BrdU
        BackgroundInformationThethymidineanalog5-bromo-2′-deoxyuridine(BrdU)isacommonreagentusedforbothcellproliferationassaysandforthedetectionofapoptoticcells.BrdUisreADIlyincorporatedintonewlysynthesizedDNA,labelingcellsthathaveprogressedthroughtheS-phaseofthecellcycleandtherebyservingasaMarkerforproliferatingcells.
        ProductInformation
        FormatPurified
        Control
        • Brdutreatedcells
        PresentationLiquidin10mMPhosphatebuffer,pH7.4containing150mMNaCland0.1%sodiumazide.
        StorageandShippingInformation
        StorageConditionsMaintainfor2yearsat-20°Cfromdateofshipment.Aliquottoavoidrepeatedfreezingandthawing.Formaximumrecoveryofproduct,centrifugetheoriginalvialafterthawingandpriortoremovingthecap.
        Applications
        ApplicationAnti-BrdUAntibody,clone131-14871isaMouseMonoclonalAntibodyfordetectionofBromodeoxyuridinealsoknownasBrdU&hasbeenvalidatedinFC,IHC,IHC(P).Thisbromodeoxyuridineantibodyisexpecttoreactinallspecies.
        KeyApplications
        • FlowCytometry
        • Immunohistochemistry
        • Immunohistochemistry(Paraffin)
        ApplicationNotesImmunohistochemistryondeparaffinizedsectionsofkidney,duodenum,andlivertissue:1:1000-1:1250.

        Flowcytometryon100μLof106cells:1:5000.

        Optimaldilutionsmustbedeterminedbytheenduser.

        IMMUNOHISTOCHEMICALPROCEDURE

        FORPARAFFINEMBEDDEDTISSUESECTIONS

        STAININGPROCEDURE:

        1.Deparaffinizesectionsinxylene3x5minutes.ResinembeddedorGMA(Glycolmethacrylate,2-hydroxyethylmethacrylate)treatedsectionsitisunnecessarytodeparaffinizeasthereisnoparaffin.

        2.Placeslidesingradedalcohols(100,95,90%)towaterat2minuteintervals,andairdry.(OmitforGMAsections)

        3.CirclesectionswithPAPpenordiamondpentoidentifyanddrythoroughly.

        4.ForGMAorresinsections,placeslidesin0.5%Tween/PBS(pH7.6)for29minutes.

        5.Incubateinprewarmed(40°C)1NHClfor1hour.

        6.Wash3x3minuteswithPBS(pH7.6).Slidesmaybeheldatthispointandtheprocedurecontinuedthefollowingday.

        7.Incubatein1XTrypsinsolution(0.02-0.05%w/v,prewarmedto40°C)for20minutesatroomtemperatureforNBF(normalbufferedformalin)fixedtissueor10minutesforCarnoy"sfixedtissue.

        8.Wash3x5minuteswithPBS(pH7.6).

        9.Incubatesectionsin1%H2O2(10mL30%H2O2in290mLmethanol)for20minutes,orGMAsectionsin3%H2O2(10mL30%H2O2in90mLwater)for3minutes.

        10.Wash2x2minuteswithPBS(pH7.6).

        11.UsingtheVectorABCkit,add3dropsofnormalhorseserumto10mLofPBS.Usethissolutiontoblocktheslidesfor20minutesatroomtemperature.

        12.BlottheslidesofexcessnormalhorseserumandincubatewithMAB4072dilutedinPBS/BSA/Tween20for1houratroomtemperature.

        13.Wash3x3minuteswithPBS(pH7.6).

        14.Add3dropsofnormalhorseserumto10mLofPBSandthenadd1dropofbiotinylatedantibodystock.Incubatetheslideswiththisdilutedsecondantibodyfor30minutesatroomtemperature.

        15.PreparetheVectastainABCReagentbyadding2dropsofreagentAto5mLofPBS.Thenadd2dropsofReagentBtothesamemixingbottle.Allowtositforabout30minutespriortouse.

        16.Wash3x3minuteswithPBS(pH7.6).

        17.IncubatetheslideswithABCReagentfor30minutesatroomtemperature.

        18.Wash3x3minuteswithPBS(pH7.6).

        19.Preparethesubstratebymixinganequalvolumeof0.02%H2O2(madeindistilledwaterfroma30%stocksolution)and0.1%DABmadein0.1MTrisbuffer,pH7.2.TheH2O2shouldbefreshlypreparedfromconcentratedstock.BecausemanyperoxidesubstratesareunstableinthepresenceofH2O2orwhenexposedtolight,thesubstrateshouldbepreparedjustpriortouse.SinceDABisasUSPectedcarcinogen,careshouldbetakeninhandlinganddisposingofallperoxidasesubstrates.

        20.StaintheslideswithDABsubstratefor2-5minutes.

        21.Wash2x2minuteswithdistilledwater.

        22.Counterstainwithhemotoxylin,dehydratethroughxylene,andmountthecoverslip.
        BIOLOGicalInformation
        Clone131-14871
        ConcentrationPleaserefertotheCertificateofAnalysisforthelot-specificconcentration.
        HostMouse
        SpecificityRecognizesBrdU(Bromodeoxyuridine).
        IsotypeIgG1
        SpeciesReactivity
        • All
        AntibodyTypeMonoclonalAntibody
        PurificationMethodProteinAPurfied
        PhysicochemicalInformation
        Dimensions
        MaterialsInformation
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