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注：終止液和顯色劑具有腐蝕性，一旦接觸到液體，請盡快用大量清水沖洗。
產品介紹 Mouse IL-12/23 (p40) ELISA Kit (Mouse Interleukin-12/23 (p40) Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即小鼠白細胞介素 12 ELISA 試劑盒，可以定量檢測小鼠血清、血漿或細胞培養上清液等樣本中的天然和重組 IL-12/23 (p40)濃度。白細胞介素 12，也稱為自然殺傷細胞刺激因子或細胞毒性淋巴細胞成熟因子，是一種多效性細胞因子，主要由活化的巨噬細胞、樹突狀細胞和中性粒細胞產生，有致炎作用和免疫調節作用。IL-12 的是由二硫鍵相連異源二聚體，70 kDa (p70)的異二聚體糖蛋白由 40 kDa (p40)和 35 kDa (p35)兩個亞基組成。p40 和 p35 亞基沒有 IL-12 的活性，但 p40 同型二聚體可與 IL-12 的受體結合，是 IL-12 的拮抗劑。IL-12 等電點為 pH4.5-5.5。小鼠 IL-12 P35 有 193 個氨基酸殘基，與人 IL-12 P35 有 66％同源性，小鼠 P40 有 313 個氨基酸殘基與人 P40 有 70％同源性。鼠 IL-12 對人類和小鼠細胞均有活性，人IL-12 作用有種屬特異性，人 IL-12 對小鼠細胞作用甚微。IL-12 的生物學功能包括體外效應和體內效應。體外效應：IL-12 能誘導 PHA 刺激的 T 細胞增殖。IL-12 能增加 CD56 ＋NK 細胞的活性；誘導 NK 細胞或 PBMC 增殖和產生 LAK 活性，增加 NK 細胞表達表面分子；促進 NK 細胞產生 IFN-γ 和 TNF-α（TGF-β和 IL-10 抑制該效應）。IL-12 在 BCG 和 LPS 誘導的小鼠炎性休克所致的死亡中起重要作用。IL-12 通過誘導 TNF-α和 IFN-γ，抑制骨髓造血。IL-12 還有抗血管生成作用。體內效應：將 IL-12 輸入動物體內可以增強 NK 細胞的殺傷活性、增加 IFN-γ分泌、啟動造血細胞大量生成、增強異體排斥反應并可能介導抗腫瘤效應。IL-12 在某些 Th1 介導的自身免疫疾病中起重要作用。IL-12 誘導動物脾腫大，其中含有大量造血細胞，紅細胞系、髓樣細胞系和巨核細胞系都增加。IL-2 抑制骨髓造血的作用可能與誘導 NK 細胞產生 IFN-γ等有關。在小鼠腫瘤模型中，IL-12 的抗腫瘤作用依賴 IFN-γ的增加，且與 IL-2、IFN-α以及一些化學治療藥物有協同抗腫瘤作用。IL-12 發揮生物學效應所需的細胞因子濃度很低(≤pM)， 與合適劑量 IL-2 聯合應用可降低 IL-2 用量，同時提高 CTL、NK、LAK 的殺傷活性，因此 IL-12 可能成為一種新的抗腫瘤生物制劑。本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中小鼠 IL-12/23 (p40)濃度。在小鼠 IL-12/23 (p40)單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品，其中的 IL-12/23 (p40)會與其單抗結合，洗去游離成分；加入生物素化的抗小鼠 IL-12/23 (p40)抗體，抗小鼠 IL-12/23 (p40)抗體與結合在單抗上的小鼠 IL-12/23 (p40)結合而形成免疫復合物，洗去游離的成分；加入辣根過氧化物酶標記的親合素，生物素與親合素特異性結合，洗去未結合的酶結合物；加入顯色劑，若反應孔中有 IL-12/23 (p40)，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現藍色；加終止液變為黃色。在 450 nm 下測 OD 值，小鼠 IL-12/23 (p40)濃度與 OD 450 值之間呈正比，可通過繪制標準曲線計算出樣品中小鼠 IL-12/23 (p40)濃度。
UE-M6142S/M6142M/M6142L◆沒有信號？1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復實驗；檢查試劑配制方法；復核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量；增加抗體用量（濃度）。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結合較差。使用ELISA板，而非組織培養板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現規則藍色？1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標準曲線差？1.鏈親和素-HRP結合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結合較差。使用酶標板，而非組織培養板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標準曲線。
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