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    NEB/ProtoScript? II Reverse Transcriptase/M0368S/10,000 units
    • NEB/ProtoScript? II Reverse Transcriptase/M0368S/10,000 units

    NEB/ProtoScript? II Reverse Transcriptase/M0368S/10,000 units

    價格: ￥2040.00 市場價: 3400.00
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    貨號: M0368S-10,000units
    品牌: NEB
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      • Description:

        ProtoScript?IIReverseTranscriptaseisarecombinantM-MuLVreversetranscriptasewithreducedRNaseHactivityandincreasedThermostABIlity.ItcanbeusedtosynthesizefirststrandCDNAathighertemperaturesthanthewildtypeM-MuLV.Theenzymeisactiveupto48°C,providinghigherspecificity,higheryieldofcDNAandmorefull-lengthcDNAproductupto12kb.

        ProtoscriptIIReverseTranscriptaseperformsaswellasotherRNaseH–?ReverseTranscriptasesProtoscript II Reverse Transcriptase performs as well as other RNase H– Reverse Transcriptases

        JurkattotalRNA(1μg)wasusedina20μlfirststrandcDNAsynthesis.Mixturesofallreactioncomponents,exceptforreversetranscriptase,wereheldatdifferenttemperaturesfor3min.200unitsSuperScript?II(A)orNEB’sProtoScriptIIReverseTranscriptase?(B)wasaddedandincubatedattheindicatedtemperaturefor50minutes,followedbyheatinactivationfor5minat80°C.1μlofcDNAwasusedina25μlPCRusingLongAmp?Taq?MasterMix(NEB#M0533)for35–40cycles.?LadderListhe2LogDNALadder(NEB#N0469).?
        RobustcDNAsynthesisisachievedevenwithlongertemplatesRobust cDNA synthesis is achieved even with longer templates

        JurkattotalRNA(1μg)wasusedina20μlfirststrandcDNAsynthesiswith200unitsofNEBProtoScriptIIReverseTranscriptase.Reactionswereincubatedat42°Cfor50minutes,followedbyheatinactivationfor5minutesat80°C.1μlofcDNAwasusedina25μlPCRusingLongAmp?Taq?MasterMix(NEB#M0533)for35–40cycles.Sizesareindicatedabovegel.?
        GeneratehighqualitycDNAevenwithverylowamountsofstartingRNAGenerate high quality cDNA even with very low amounts of starting RNA

        DecreasingamountsofJurkattotalRNA(1μg–1pg)wereusedin20μlfirststrandcDNAsynthesiswith200unitsofNEBProtoScriptIIReverseTranscriptase.Reactionswereincubatedat42°Cfor50minutes,followedbyheatinactivationfor5minutesat80°C.1μlofcDNAwasusedina25μlPCRusingLongAmp?Taq?MasterMix(NEB#M0533)for40cycles.Thetargetisa0.6kbfragmentofGAPDH.LadderListhe2-LogDNALadder(NEB#N0469).?
        ProtoScriptIIReverseTranscriptase?displayssuperiorsensitivityProtoScript II Reverse Transcriptase displays superior sensitivity

        DecreasingamountsofluciferasemRNA(109?to102)moleculeswereconvertedintocDNAinthepresenceof1ngJurkattotalRNAusing50unitsofNEBProtoScriptIIReverseTranscriptase?inatotalreactionvolumeof20μl.1/20ofthecDNAproductwasamplifiedusingSsoAdvanced?SYBR?GreenSupermix.Asfewas5moleculesofluciferasemRNAaredetectable.

        ProductSource

        ThegeneencodingamutantM-MuLVReverseTranscriptase(RNaseH–)isexpressedinE.?coliandpurifiedtonearhomogeneity.

        ReagentsSupplied

        Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:

        Storeat(°C)Concentration
        ProtoScript?IIReverseTranscriptaseReactionBuffer-205X
        DTT(100mM)-2010X

        Notes:

        ReactionConditions:1XProtoScriptIIReverseTranscriptaseReactionBuffer,10mM?DTT,200unitsProtoScriptIIReverseTranscriptase,supplementedwith0.5mMdNTPs(notincluded)and5μMdT23VN(notincluded).Incubateat42°Cfor50minutes.If?randomprimersareused,a10minuteincubationatroomtemperatureisrecommendedbeforetransferringto42°C.
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